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藏在乳腺癌細胞里的答案,如何在放大信號時提高阿霉素代謝物的活性?

Genevac

研究分享




今天分享一篇《LC-MS Orbitrap-based metabolomics using a novel hybrid zwitterionic hydrophilic interaction liquid chromatography and rigorous metabolite identification reveals doxorubicin-induced metabolic perturbations in breast cancer cells》于2025年在發(fā)表《RCS Advances》期刊上,探究了抗癌藥物阿霉素(多柔比星)對乳腺癌細胞造成的代謝紊亂的研究,并建立一套高效的代謝組學分析流程。



阿霉素(Doxorubicin)有“紅色魔鬼”之稱,又稱“多柔比星”,屬于廣譜類的蒽環(huán)類抗腫瘤抗生素,它通過嵌入癌細胞的DNA雙鏈中,抑制調節(jié)DNA超螺旋結構的酶,阻止DNA復制和RNA轉錄,抑制腫瘤生長,從而發(fā)揮抗癌作用。阿霉素對多種惡性腫瘤都有治療作用,包括乳腺癌、肺癌、消化系統(tǒng)癌、卵巢癌、膀胱癌、肉瘤、淋巴癌及急性白血病。


Part.01

小分子代謝物的檢測難題

本研究基于代謝組學,利用高分辨率LC-MS、深度掃描數(shù)據(jù)依賴采集(DDA)以及包含990種標準的大型化學庫,精準捕捉到乳腺癌細胞在多柔比星作用下,最終鑒定出173種代謝物,其中26種代謝物和20條代謝途徑發(fā)生了顯著改變。解決了非靶向代謝組學中代謝物定性難、分離效果差的痛點。


生物體中的小分子代謝物(分子量通常<1500Da)往往濃度極低,甚至有很多關鍵差異代謝物含量遠低于質譜的檢測極限,并且這類代謝物容易發(fā)生降解,所以在樣品濃縮的過程中,如果處理不好可能會導致實驗失敗,一切歸零。


Part.02

解決方案

文章中使用Genevac S3i HT-12對阿霉素作用后的細胞粗提取物進行濃縮干燥,將目標代謝物濃縮至小體積或干燥粉末狀態(tài),使代謝物濃度提升至檢測范圍內,讓原本信號微弱的微量代謝物,能夠被質譜儀精準識別。




Part.03

Genevac S3i HT-12溶劑蒸發(fā)工作站

Genevac 一直專注于研究與生產(chǎn)各種離心蒸發(fā)濃縮設備,Genevac S3i HT-12溶劑蒸發(fā)工作站是一款非常智能和大通量的濃縮儀,其通過真空+離心+溫和控溫的共同作用,滿足在代謝組學分析過程中對樣品高活性的要求。


那HT-12是如何在濃縮過程中保持樣品活性的呢”

1

真空 —— 低溫下的“蒸發(fā)加速器”

HT-12溶劑蒸發(fā)工作站通過抽真空,大大降低溶劑沸點,樣品在低溫度下就能快速蒸發(fā),同時保護了那些對熱敏感的阿霉素代謝物,確保我們檢測到的代謝物真實反映了細胞的生理狀態(tài) 。




2

離心—— 樣品的“安全帶”

在真空環(huán)境下,低沸點溶劑非常容易暴沸,導致樣品飛濺。通過高速旋轉產(chǎn)生離心力,確保樣品在蒸發(fā)過程中始終集中在離心管底部,即使在高真空下也能平穩(wěn)蒸發(fā),避免樣品損失和交叉污染的風險 。




3

溫和控溫——精準的能量供給

SampleGuard?溫度控制技術精準控制溫度,根據(jù)探測樣品實際溫度轉子實際溫度,實時傳輸至工作站控制中心,溫度控制形成閉環(huán),避免了過熱風險。實驗證實,經(jīng)Genevac處理后的代謝物活性與標準品高度一致,降解問題得到有效控制。




4

實時溫度——蒸發(fā)過程可視化

系統(tǒng)實時顯示溫度、冷阱溫度、真空度、轉速等關鍵參數(shù),蒸發(fā)全程可視化,實驗數(shù)據(jù)可追溯和導出,確保過程可控、結果可靠,保證非靶向代謝物樣品的完整性。



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參考文獻

[1] LC-MS Orbitrap-based metabolomics using a novel hybrid zwitterionic hydrophilic interaction liquid chromatography and rigorous metabolite identification reveals doxorubicin-induced metabolic perturbations in breast cancer cells,Doi:https://doi.org/10.1039/d5ra01044f



Genevac


ATS集團是德祥集團資深合作伙伴之一。英國Genevac公司成立于1990年,隸屬ATS SP Scientific旗下,一直專注于研究和生產(chǎn)各種離心蒸發(fā)濃縮設備,其產(chǎn)品廣泛應用于生命科學、制藥、化學、分析等領域。



德祥科技


德祥科技有限公司成立于1992年,總部位于中國香港特別行政區(qū),分別在越南、廣州、上海、北京設立分公司。主要服務于大中華區(qū)和亞太地區(qū)——在亞太地區(qū)有27個辦事處和銷售網(wǎng)點,5個維修中心和2個樣機實驗室。


30多年來,德祥一直深耕于科學儀器行業(yè),主營產(chǎn)品有實驗室分析儀器、工業(yè)檢測儀器及過程控制設備,致力于為新老客戶提供更完善的解決方案。公司業(yè)務包含儀器代理,維修售后,實驗室咨詢與規(guī)劃,CRO凍干工藝開發(fā)服務以及自主產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、售后。與高校、科研院所、政府機構、檢驗機構及知名企業(yè)保持密切合作,服務客戶覆蓋制藥、醫(yī)療、商業(yè)實驗室、工業(yè)、環(huán)保、石化、食品飲料和電子等各個行業(yè)及領域。


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